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丙二醛(MDA)测试盒

简要描述:丙二醛(MDA)测试盒测定意义:
氧自由基作用于脂质的不饱和脂肪酸,生成过氧化脂质;后者逐渐分解为一系列复杂的化合物,其中包括MDA。通过检测MDA的水平即可检测脂质氧化的水平。

  • 产品型号:MDA-1-M
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2023-04-25
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详情介绍

丙二醛(MDA)测试盒测定意义:                                      

氧自由基作用于脂质的不饱和脂肪酸,生成过氧化脂质;后者逐渐分解为一系列复杂的化合物,其中包括MDA。通过检测MDA的水平即可检测脂质氧化的水平。

测定原理:

MDA与硫代酸(thiobarbituric acid,TBA)缩合,生成红色产物,在532nm有大吸收峰,进行比色后可估测样品中过氧化脂质的含量;同时测定600nm下的吸光度,利用532nm与600nm下的吸光度的差值计算MDA的含量。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配置:

提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存;

试剂一:液体30mL×1瓶,4℃保存。

注意事项:

临用前注意试剂一是否解,如未溶解,可以70℃-90℃加热,并振荡以促进溶解。

MDA提取:

1、细菌、细胞或组织样品的制备:

细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

2、血清(浆)样品:直接检测。

丙二醛(MDA)测试盒测定步骤:

1、吸取0.3mL试剂一于1.5mL离心管中,再加入0.1mL样本,混匀。

2、95℃水浴中保温30min(盖紧,防止水分散失),置于冰浴中冷却,10000g,25℃,离心10min。

3、吸取200μL上清液于微量石英比色皿或96孔板中,测定532nm和600nm处的吸光度,记为A532和A600,ΔA= A532-A600。




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