产品展示 / products 您的位置:网站首页 > 产品展示 > 生化试剂盒 > 蛋白酶系列 > YPT-1-M胰蛋//白酶测试盒

胰蛋//白酶测试盒

简要描述:测定意义:
胰蛋/白酶选择性水解变性蛋白质中由赖氨酸或氨酸的羧基所构成的肽链,是一种重要的消化酶。此外,胰蛋/白酶还广泛应用于脓胸、血胸、外科炎症、溃疡、创伤性损伤等所产生的局部水肿、血肿及脓肿等的辅助治疗。

  • 产品型号:YPT-1-M
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2023-03-20
  • 访  问  量:187
详情介绍

测定意义:                           

胰蛋/白酶选择性水解变性蛋白质中由赖氨酸或氨酸的羧基所构成的肽链,是一种重要的消化酶。此外,胰蛋/白酶还广泛应用于脓胸、血胸、外科炎症、溃疡、创伤性损伤等所产生的局部水肿、血肿及脓肿等的辅助治疗。


测定原理:

胰蛋/白酶催化水解TAME的酯键,释放出的游离羧基与反应体系中的氢氧化钠发生中和反应,导致溶液的pH值降低,以酚红为指示剂,测定溶液在555nm处吸收值的变化,可以快速测得胰蛋/白酶活性数据。胰蛋/白酶在一定范围内与555nm处吸收值的降低呈良好的线性关系。


自备仪器和用品:

酶标仪、96孔板、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。


试剂组成和配制:

提取液:液体120 mL×1瓶,4℃保存。

试剂一:液体5 mL×1瓶,4℃保存。

试剂二:液体5 mL×1瓶,4℃避光保存。

试剂三:液体2 mL×1瓶,4℃保存。


粗酶液提取:

1.组织样品:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液)冰浴匀浆,10000g,4℃离心10min,取上清,即粗酶液。


测定步骤:

1. 酶标仪预热30 min,调节波长到555 nm。

2. 工作液的配制:临用前根据用量按照试剂一(V):试剂二(V):蒸馏水(V):试剂三(V)=1 mL:1 mL:5.4 mL:0.4 mL的比例充分混合。(注意:现用现配,用多少配多少,在空瓶中配制,试剂盒中带有4个空瓶)

3. 吸取5μL样本,加入195 μL工作液,混匀后立即测定,记录555nm下1min时的吸光值A1和2min时的吸光值A2。计算△A=A1-A2

注意:如果△A小于0.005,可将反应时间延长到5min。如果△A大于0.5,体系迅速变色,可将样本用提取液稀释后测定(建议稀释10倍),计算公式中乘以相应稀释倍数。




留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7