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乳酸脱氢酶(LDH)测试盒

简要描述:测定意义:

LDH(EC 1.1.1.27)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是糖酵解途径的末端酶,催化丙酮酸与乳酸之间的可逆反应,伴随着NAD+/NADH之间互变。

  • 产品型号:LDH-2-V
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2023-03-20
  • 访  问  量:198
详情介绍

测定意义:

LDHEC 1.1.1.27)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是糖酵解途径的末端酶,催化丙酮酸与乳酸之间的可逆反应,伴随着NAD+/NADH之间互变。

 

测定原理:

LDH催化NAD+氧化乳酸生成丙酮酸,丙酮酸进一步与2, 4 - 二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙,在碱性溶液中显棕红色,颜色深浅与丙酮酸浓度成正比。

自备的仪器和用品:

可见分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

 

试剂的组成和配制:

提取液:30mL×1瓶, 4℃保存;

试剂一:液体15 mL×1 4℃保存; 

试剂二:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入10μL试剂五和1.3 mL蒸馏水充分溶解备用,用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融

试剂三:液体15 mL×1瓶,4℃保存; 

试剂四:液体50 mL×1瓶,4℃保存; 

试剂五:液体100μL×14℃保存;

 

样品测定的准备:

1、细菌、细胞或组织样品的制备:

细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为1000~50001的比例(建议2000万细菌或细胞加入1mL提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4离心10min,取上清,置冰上待测。

组织:按照组织质量(g:提取液体积(mL)15~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4离心10min,取上清,置冰上待测。

2血清(浆)样品:直接检测。

 




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