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辅酶ⅡNADP(H)含量

简要描述:测定意义:
辅酶ⅡNADP(H)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,NADP+和NADPH含量测定可以计算NADP(NADPH + NADP+ )含量和NADPH/NADP+比值,其变化与磷酸戊糖途径和生物合成以及抗氧化反应密切相关。NADPH/NADP+比值不仅是细胞氧化还原态的主要标志之一,而且在PPP途径、生物合成和抗氧化代谢中具有重要调控作用。

  • 产品型号:NADP-1-M
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2023-03-22
  • 访  问  量:183
详情介绍

测定意义:

辅酶ⅡNADP(H)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,NADP+和NADPH含量测定可以计算NADP(NADPH + NADP+ )含量和NADPH/NADP+比值,其变化与磷酸戊糖途径和生物合成以及抗氧化反应密切相关。NADPH/NADP+比值不仅是细胞氧化还原态的主要标志之一,而且在PPP途径、生物合成和抗氧化代谢中具有重要调控作用。


测定原理:

分别用酸性和碱性提取液提取样品中NADP+和NADPH。NADPH通过PMS的递氢作用,使氧化型噻唑蓝(MTT)还原为甲瓒,570nm下检测吸光值,从而测定NADPH含量。利用6-磷酸葡萄糖脱氢酶还原NADP+为NADPH,从而检测NADP+含量。


所需的仪器和用品:

酶标仪、台式离心机、可调式移液器、96孔板、研钵、冰和蒸馏水。


试剂的组成和配制:

酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;

碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;

试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存; 

试剂二:粉剂×1支,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀;溶解后4 ℃保存一周;

试剂三:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀;溶解后4℃保存一周;

试剂四:粉剂×1支,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀;溶解后4℃保存一周;

试剂五:液体3.6mL×1支,4 ℃保存;

试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;

试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。




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