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NADP磷酸酶(NADPase)测试盒

简要描述:测定意义:
NADPase主要存在于植物组织中,是生物体内一催化NADP+降解为NAD+的酶,与NADK一起调控NAD和NADP之间的平衡

  • 产品型号:NADPA-1-M
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2023-03-22
  • 访  问  量:174
详情介绍

测定意义:

NADPase主要存在于植物组织中,是生物体内催化NADP+降解为NAD+的酶,与NADK一起调控NAD和NADP之间的平衡。


测定原理:

NADPase能够催化NADP+水解为NAD+和无机磷的反应,通过测定无机磷的量来测定NADPase活性。

所需的仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水


试剂的组成和配制:

提取液:100mL×1瓶,4℃保存。

试剂一:液体15 mL×1瓶, 4℃保存。

试剂二:粉剂×4支,-20℃保存;用时加入1 mL试剂一充分溶解备用,现配现用。

试剂三:粉剂×1 瓶, 4℃保存。用时加入25mL蒸馏水,溶解后4℃可保存一周。

试剂四:粉剂×1瓶, 4℃保存。用时加入25mL蒸馏水,溶解后4℃可保存一周。

试剂五:液体 25mL×1 瓶,室温保存。

试剂六:10mmol/L 标准磷贮备液 10mL×1 瓶,4℃保存。

0.5μmol/mL 标准磷应用液配制:将试剂六20倍稀释,即取 0.5mL试剂六加9.5蒸馏水,充分混匀。

定磷试剂的配制:按H2O: 试剂三:试剂四:试剂五=2:1:1:1 的比例配制,配好的定磷试剂

              应为浅黄色,若无色则试剂失效,若是蓝色则为磷污染,定磷剂现用现配。

注意:配试剂好用新的烧杯、玻棒和玻璃移液器,也可以用一次性塑料器皿,避免磷污染。



样本的前处理:

按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。




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