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NADP苹果酸酶(NADP-ME)测试盒

简要描述:测定意义:
ME广泛存在于微生物、培养细胞、动物和植物胞浆中,尤其在植物组织中活性较高。ME催化苹果酸氧化脱羧的可逆反应,产生丙酮酸和CO2,以及伴随NAD(P)+的还原反应,是苹果酸代谢的关键酶。ME活性与生物合成和抗氧化密切相关。近年来植物ME活性测定较多,已经成为抗氧化研究的热点。根据辅酶专一性和对底物特异性的不同,可将ME分为NAD-ME(EC1.1.1.38)和NADP-ME(EC1.1

  • 产品型号:NADPME-2-UV
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2023-03-22
  • 访  问  量:140
详情介绍

测定意义:

ME广泛存在于微生物、培养细胞、动物和植物胞浆中,尤其在植物组织中活性较高。ME催化苹果酸氧化脱羧的可逆反应,产生丙酮酸和CO2,以及伴随NAD(P)+的还原反应,是苹果酸代谢的关键酶。ME活性与生物合成和抗氧化密切相关。近年来植物ME活性测定较多,已经成为抗氧化研究的热点。根据辅酶专一性和对底物特异性的不同,可将ME分为NAD-ME(EC1.1.1.38)和NADP-ME(EC1.1.1.40)。


测定原理:

NADP-ME催化NADP+还原成NADPH,在340nm下测定NADPH增加速率。


需自备的仪器和用品:

紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL石英比色皿和蒸馏水。


试剂的组成和配制:

提取液:60mL×1瓶,4℃保存。;

试剂一:液体60mL×1瓶,4℃保存;

试剂二:粉剂×1瓶,-20℃保存; 临用前加入50mL试剂一充分振荡,溶解待用,用不完的试剂分装后-20度保存,禁止反复冻融。

试剂三:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入6mL蒸馏水充分振荡,溶解待用,用不完的试剂分装后-20度保存,禁止反复冻融。


样本的前处理: 

1、细菌、细胞或组织样品的制备:

细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);14000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。14000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

2、血清(浆)样品:直接检测。




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