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谷胱甘肽S-转移酶(GST)

简要描述:谷胱甘肽S-转移酶(GST)测定意义:
GST 是一种具有多种生理功能的蛋白质家族,主要存在于细胞质内。GST是体内解毒酶系统的重要组成部分,主要催化各种化学物质及其代谢产物与GSH的巯基共价结合,使亲电化合物变为亲水物质,易于从胆汁或尿液中排泄,达到将体内各种潜在或具备毒性的物质降解并排出体外的目的。

  • 产品型号:GST-2-UV
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2024-05-14
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详情介绍

谷胱甘肽S-转移酶(GST)测定意义:

GST是一种具有多种生理功能的蛋白质家族,主要存在于细胞质内。GST是体内解毒酶系统的重要组成部分,主要催化各种化学物质及其代谢产物与GSH的巯基共价结合,使亲电化合物变为亲水物质,易于从胆汁或尿液中排泄,达到将体内各种潜在或具备毒性的物质降解并排出体外的目的。因此,GST在保护细胞免受亲电子化合物的损伤中发挥着重要的生物学功能。此外,因为GST具有GSH-Px活性,亦称为non-Se GSH-Px,具有修复氧化破坏的大分子如DNA、蛋白质等的功能。注意,GST催化的反应减少GSH含量,但是不增加GSSG含量。

测定原理:

GST催化GSH与CDNB结合,其结合产物的光吸收峰波长为340nm;通过测定340nm 波长处吸光度上升速率,即可计算出GST活性。

自备仪器和用品:

紫外分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调节移液器、1mL石英比色皿和蒸馏水。

试剂组成和配置:

试剂一:液体 50mL×1瓶,4℃保存。

试剂二:液体 45mL×1瓶,4℃保存。

试剂三:粉剂×1瓶,4℃保存。临用前加5mL蒸馏水溶解。

谷胱甘肽S-转移酶(GST)粗酶液提取:

1. 组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为 1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆。8000g,4℃离心10min,取上清置冰上待测。

2. 细菌、真菌:按照细胞数量(104 个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后8000g,4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。

3. 血清等液体:直接测定。

 

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