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单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR)

简要描述:测定意义:
MDHAR催化MDHA还原生成AsA,在抗坏血酸氧化还原代谢中具有重要作用

  • 产品型号:MDHAR-1-M
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2024-05-14
  • 访  问  量:367
详情介绍

测定意义:

MDHAR催化MDHA还原生成AsA,在抗坏血酸氧化还原代谢中具有重要作用。


测定原理:

MDHAR 催化 NADH 还原MDHA 生成 AsA和NAD+,NADH在340 nm有特征吸收峰,但是NAD+没有。通过测定340 nm光吸收下降速率,来计算出MDHAR活性。


实验中所需仪器及设备:

研钵、冰、台式离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、可调式移液枪和双蒸水


试剂组成和配置:

试剂一:液体100mL×1瓶,4℃保存。

试剂二:液体20mL×1瓶,室温保存。

试剂三:粉剂×1瓶(棕色),4℃保存。临用前加入3 mL蒸馏水充分溶解。

试剂四:粉剂×1瓶,4℃保存。临用前加入2.5 mL蒸馏水充分溶解。

试剂五:液体15μL×1瓶,4℃保存。临用前加3 mL试剂二充分溶解。


粗酶液提取:

1.组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆。8000g,4℃离心10min,取上清置冰上待测。

2.. 细菌、真菌:按照细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);8000g ,4℃离心20min,取上清液置冰上混匀待测。

3.  血清等液体:直接测定。




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