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超氧化物歧化酶(SOD)测试盒(WST-8法)

简要描述:测定意义:
SOD(EC 1.15.1.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化超氧化物阴离子发生岐化作
用,生成 H2O2 和 O2。SOD 不仅是超氧化物阴离子清除酶,也是 H2O2 主要生成酶,在生物抗氧化系统中具有重要作用

  • 产品型号:SOD-1-M
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2023-03-24
  • 访  问  量:180
详情介绍

测定意义:

SOD(EC 1.15.1.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化超氧化物阴离子发生岐化作

用,生成 H2O2 和 O2。SOD 不仅是超氧化物阴离子清除酶,也是 H2O2 主要生成酶,在生物抗氧化系

统中具有重要作用。

测定原理:

通过嘌呤及嘌呤氧化酶反应系统产生超氧阴离子(O2-),O2-可与 WST-8 反应产生水溶性染料甲

臜,后者在 450nm 处有吸收;SOD 可清除 O2-,从而抑制了甲臜的形成;反应液黄色越深,说明 SOD

活性愈低,反之活性越高。

需自备的仪器和用品:

酶标仪、离心机、移液器、96 孔板、研钵、冰和蒸馏水

试剂的组成和配制:

提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;

试剂一:液体 20mL×1 瓶,4℃避光保存;

试剂二:液体 150μL×1 支,4℃避光保存;

试剂三:液体 200μL×1 支,4℃保存;

试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。

粗酶液提取:

1. 细菌、细胞或组织样品的制备:

细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104 个):

提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液),超声波破碎

细菌或细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次); 8000g 4℃离心

10min,取上清,置冰上待测。

组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL

提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

2. 血清(浆)样品:直接检测。




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