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吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS)

简要描述:吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS)试剂盒说明书
微量法100管/48样
测定意义:
脯/氨酸是植物体内适应逆境胁迫的一种重要的渗透调节物质。高等植物中脯/氨酸代谢因其初始底物不同,分为谷/氨酸( Glu) 和鸟/氨酸( Orn) 两条合成途径。

  • 产品型号:P5CS-1-M
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2024-05-15
  • 访  问  量:260
详情介绍

吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS)试剂盒说明书

微量法100管/48样

测定意义:                           

脯/氨酸是植物体内适应逆境胁迫的一种重要的渗透调节物质。高等植物中脯/氨酸代谢因其初始底物不同,分为谷/氨酸( Glu) 和鸟/氨酸( Orn) 两条合成途径。吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS, Δ1-pyrroline-5-carboxylate synthetase)是以谷/氨酸为前体合成脯/氨酸途径的关键酶,对植物适应逆境胁迫起关键作用。


测定原理:

吡咯啉-5-羧酸合成酶催化谷/氨酸生成P5C过程中分解ATP生成ADP和无机磷,通过钼酸铵比色法测定单位时间内产生无机磷的量可确定P5CS活性。


需自备的仪器和用品:

紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。


试剂组成和配制:

试剂一:液体60 mL×1瓶,4℃保存;

试剂二:液体12 mL×1瓶,4℃保存;

试剂三:液体12 mL×1瓶,4℃保存;

试剂四:粉剂×1瓶,4℃保存,用时加入25 mL蒸馏水,溶解后4℃保存一周;

试剂五:粉剂×1瓶,4℃保存,用时加入25 mL蒸馏水,溶解后4℃保存一周;

试剂六:液体25mL×1瓶,室温保存;

试剂七:10mmol/L标准磷贮备液10mL×1瓶,4℃保存。

0.5μmol/mL 标准磷应用液配制:将试剂七 20倍稀释,即取 0.1mL试剂七加1.9mL蒸馏水充分混匀。

定磷剂的配制:按H2O: 试剂四:试剂五:试剂六=2:1:1:1 的比例配制,配好的定磷剂应为浅黄色。若无色则

试剂失效,若是蓝色则为磷污染,定磷剂现用现配。

注意:配试剂最好用新的烧杯、玻棒和玻璃移液器,也可以用一次性塑料器皿,避免磷污染。




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