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磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)测试盒

简要描述:磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)测试盒
微量法100管/96样

注 意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
PEPCK(EC 4.1.1.32)广泛存在于动物、植物、微生物和细胞中,催化草酰乙酸转化为磷酸烯醇式丙酮酸,是调节糖异生途径的关键酶。

  • 产品型号:PEPCK-1-M
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2023-04-26
  • 访  问  量:225
详情介绍

磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)测试盒

微量法100管/96样

 

   意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

PEPCKEC 4.1.1.32广泛存在于动物、植物、微生物和细胞中,催化草酰乙酸转化为磷酸烯醇式丙酮酸是调节糖异生途径的关键酶

 

测定原理:

PEPCK催化草酰乙酸生成磷酸烯醇式丙酮酸CO2,丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶进一步依次催化NADH氧化生成NAD+,在340nm下测定NADH下降速率,即可反映PEPCK活性。

 

自备的仪器和用品:

分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

 

试剂的组成和配制:

提取液:100mL×1瓶,4保存;

试剂一:液体18 mL×1瓶, 4保存; 

试剂二:液体16.5uL×1支,4保存

试剂粉剂×1 -20保存;

试剂:粉剂×1支,-20保存

 

样本的前处理 

1细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~10001的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4离心10min,取上清,置冰上待测。

2组织:按照组织质量(g:提取液体积(mL)15~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4离心10min,取上清,置冰上待测。

3、血清(浆)样品:直接检测。

 磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)测试盒




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