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糖原磷酸化酶a(GPa)测试盒

简要描述:糖原磷酸化酶a(GPa)测试盒
分光光度法 50 管/48 样

测定意义:
糖原磷酸化酶(Glycogen phosphorylase,GP,EC 2.4.1.1))是糖原分解代谢的关键酶,使糖 原分子从非还原端逐个断开 α-1,4-糖苷键移去葡萄糖基,释放 1-磷酸葡萄糖,直至临近糖 原分子 α-1,6-糖苷键分支点前 4 个葡萄糖基处。

  • 产品型号:GPA-2-UV
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2023-04-27
  • 访  问  量:232
详情介绍

糖原磷酸化酶a(GPa)测试盒

分光光度法 50 管/48 样 

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定 

测定意义: 

糖原磷酸化酶(Glycogen phosphorylase,GP,EC 2.4.1.1))是糖原分解代谢的关键酶,使糖原分子从非还原端逐个断开 α-1,4-糖苷键移去葡萄糖基,释放 1-磷酸葡萄糖,直至临近糖原分子 α-1,6-糖苷键分支点前 4 个葡萄糖基处。GP 分为有活性的糖原磷酸化酶 a(GPa)和无活性的糖原磷酸化酶 b(GPb)两种形式。糖原的分解主要在 GPa 的催化下进行。 

测定原理: 

未添加激活剂时,GPa 催化糖原和无机磷产生葡萄糖残基生成糖原和 1-磷酸葡萄糖,磷酸葡萄糖变位酶和 6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步依次催化 NADP 还原生成 NADPH,在 340nm下测定 NADPH 上升速率,即可反映 GPa 活性。 

需自备的仪器和用品: 

紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1 mL 石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 

试剂的组成和配制: 

提取液:60mL×1 瓶,4℃保存; 

试剂一:液体 40 mL×1 瓶, 4℃保存; 

试剂二:粉剂×1 瓶,-20℃保存; 

试剂三:粉剂×1 支,-20℃保存; 

试剂四:粉剂×1 支, -20℃保存; 

样本的前处理:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。 

测定步骤: 

1、 分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 340nm,蒸馏水调零; 

2、 工作液的配制:临用前将试剂二转移到试剂一中混合溶解待用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。糖原磷酸化酶a(GPa)测试盒



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