羧酸酯酶(CarE)活性测定试剂盒说明书
微量法 100管/96样
测定意义:
哺乳动物CarE,也称脂族酯酶(aliesterase),广泛分布于组织和器官,属于丝/氨酸水解酶家族。CarE 催化含酯键、酰胺键和硫酯键的内源性与外源性物质水解,但不能催化水解乙酰胆/碱及其类似物。CarE 参与脂质运输和代谢,并且与多种药物、环境毒物以及致癌物的解毒和代谢有关,有机磷农药可结合并且抑制CarE 活性。
测定原理:
CarE 能催化乙酸-1-萘酯生成萘酯,固篮显色;在 450 nm 光吸收增加速率,计算 CarE 活性。
自备仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96 孔板、低温离心机、水浴锅、可调式移液枪和蒸馏水。
试剂组成和配置:
试剂一:液体×1 瓶,4℃保存。
试剂二:液体 15mL×2 瓶, 4℃保存;
试剂三:粉剂×2 支, 4℃保存,临用前取 1 支试剂三,加 0.6ml 无水乙醇充分溶解;
试剂四:粉剂×2 支,-20℃保存,临用前取 1 支试剂四,加少量试剂二溶解;
工作液配制:临用前配制,向 1 瓶试剂二中,加入溶解后的试剂三和试剂四各 1 支,充分溶
解,过滤,4℃避光保存,可用 1 周。