抗坏血酸氧化酶（AAO）测试盒

微量法 100T/96S 

注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。 

测定意义： 

AAO 是定位于植物细胞壁的糖蛋白，属“蓝铜氧化酶"家族。细胞壁内的抗坏血酸和 AAO 与细胞壁的代谢和生长有着密切的联系。AAO 氧化 AsA 所形成的 MDHA 可通过质膜上的细胞色素 b 还原，该过程中电子的跨膜运输能够促进细胞生长。 

测定原理： 

AAO 可直接氧化 AsA，通过测定 AsA 的氧化量，可计算得 AAO 活力。 

实验中所需仪器及设备： 

低温离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板（UV 板）、可调式移液器、研钵、冰、蒸馏水。 

试剂组成和配制： 

试剂一：液体 100mL×1 瓶，4℃保存。 

试剂二：液体 20mL×1 瓶，4℃保存。 

试剂三：粉剂×2 瓶，4℃避光保存。 

粗酶液提取： 

按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL试剂一）进行冰浴匀浆。16000g，4℃离心 10min，取上清置冰上待测。 

AAO 活性计算公式： 

a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下 

(1). 按蛋白浓度计算AAO 活性单位定义：25℃中每毫克蛋白每分钟氧化 1nmol AsA 为 1 个酶活单位。AAO(nmol/min /mg prot) = △A÷(ε×d）×V 反总×109÷(Cpr×V 样)÷T= 92.4×△A÷Cpr  抗坏血酸氧化酶（AAO）测试盒