丙酮酸脱氢酶（PDH)测试盒

分光光度法 50 管/48 样 

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定 

测定意义 

PDH（EC 4.1.1.1）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是丙酮酸脱氢酶复合体(PDHC)催化丙酮酸氧化脱羧的限速酶，催化丙酮酸脱梭生成羟-乙-基-TPP，把糖酵解和三羧酸循环连接起来。 

测定原理 

PDH 催化丙酮酸脱氢，同时还原 WST-8 产生黄色物质，从而导致 450nm 光吸收的增加。 

需自备的仪器和用品 

可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 

试剂的组成和配制  丙酮酸脱氢酶（PDH)测试盒

试剂一：50mL×1 瓶，-20℃保存； 

试剂二：10mL×1 瓶，-20℃保存； 

试剂三：1mL×1 支，-20℃保存； 

试剂四：液体 30mL×1 瓶，4℃保存； 

试剂五：粉剂×1 瓶，-20℃保存，临用前加入 20mL 蒸馏水溶解待用，用不完的-20℃保存； 

试剂六：液体 6mL×1 瓶，4℃避光保存； 

样本的前处理组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离： 

1、 称取约 0.1g 组织或收集 500 万细菌或细胞，加入 1mL 试剂一和 10uL 试剂三，用冰浴匀浆器或研钵匀浆。 

2、 将匀浆 600g，4℃离心 5min。