土壤酸性磷酸酶(S-ACP)测试盒

荧光法 100 管/96 样 

注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。 

测定意义： 

 土壤磷酸酶是一类催化土壤有机磷矿化的酶，其活性的高低直接影响着土壤中有机磷的分解转化及其生物有效性，是评价土壤磷素生物转化方向与强度的指标。土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和 pH 显著影响，根据最适 pH 范围，通常分为酸性、中性和碱性三种类型。 

测定原理： 

4-羟甲基-7-香豆-素(MUB)在 365 nm 波长处激发, 能在 470 nm 处检测到荧光, 它与某些物质结合后荧光特性消失, 通过酶的水解作用MUB释放出来, 通过检测荧光量来表征酶活性。 

自备仪器和用品： 

多功能酶标仪、恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、冰、蒸馏水。 

试剂组成和配制： 

试剂一：液体 120mL×1 瓶，4℃保存。 

试剂二：粉剂×1 瓶，4℃避光保存。用前加 11 mL 蒸馏水充分溶解。 

试剂三：液体 10mL×1 瓶，4℃保存。粗酶液提取：新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干，过 30~50 目筛。

按照土壤质量（g）：试剂一 mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 土壤，加入 1mL 试剂一），振荡混匀。 

测定步骤： 

1. 测定管：在震荡条件下取 100 μL 土壤悬液到 EP 管中，加入 100 μL 试剂二，30℃震荡避光培养 3 h，从中吸取 134 μL 到黑色不透光 96 孔板中，加入 66 μL 试剂三后用多功能酶标仪进行检测，激发光波长 365 nm，测定波长 470nm。 土壤酸性磷酸酶(S-ACP)测试盒