维生素B6测试盒

分光光度法 50 管/48 样 

注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。 

测定意义 

维生素 B1（Vitamin B1）是构成脱羧辅酶的主要成分，参与细胞代谢中的三羧酸循环，是维持机体正常代谢必须的水溶性-维生素，在生物体能量代谢中有重要的作用。 

测定原理 

VB1 在碱性条件下还原铁氰化-钾生成亚铁氰化-钾，亚铁氰化-钾与 Fe3+在弱酸条件下生成普鲁士蓝，在 704nm 有特征吸收峰。

自备实验用品及仪器 

天平、研钵、离心机、可见分光光度计、恒温水浴锅、1 mL 玻璃比色皿、蒸馏水。 

试剂组成和配制 

提取液：液体 35mL×1 瓶，4℃保存。 

试剂一：液体 1mL×1 瓶，4℃保存。 

试剂二：液体 5mL×1 瓶，4℃保存。 

试剂三：液体 5mL×1 瓶，4℃避光保存。 

试剂四：液体 12mL×1 瓶，4℃保存。 

试剂五：液体 6mL×1 瓶，4℃避光保存。 

样本处理 

1. 组织：将样品磨碎，按照质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约0.1g，加入 0.6mL 提取液）加入提取液，60℃浸提 30min，加蒸馏水 0.4mL，混匀后于25℃，13000g 离心 10min，取上清测定（动物组织等蛋白含量较高的样本建议离心 20-30分钟）。

2. 细胞：按照细胞数量（104 个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500万细胞加入 0.6mL 提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min）；加蒸馏水 0.4mL，混匀后于 25℃，13000g 离心 10min，取上清测定。维生素B6测试盒