L-半乳糖酸-1,4-内酯脱氢酶(Gal LDH)测试盒

L-半乳糖酸-1,4-内酯脱氢酶(Gal LDH)测试盒

分光光度法 50 管/48 样 

注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。 

测定意义：L-半乳糖途径是合成 AsA 的主要途径。Gal LDH 位于线粒体内膜，负责催化植物体内 AsA生物合成的最后一步，也是该途径的关键酶之一，对植物体内 AsA 含量的积累起着至关重要的作用。 

测定原理： 

Gal LDH 催化 L-半乳糖内酯还原细胞色-素 c（Cyt c），还原型 Cyt c 在 550nm 有吸收峰；测定还原型 Cyt c 增加速率，来计算 Gal LDH 活性。 

自备仪器和用品： 

台式离心机、可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。 

试剂组成和配制： 

试剂一：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。 

试剂二：粉剂×1 瓶，4℃保存。临用前加入 40mL 蒸馏水，充分溶解。 

试剂三：粉剂×1 瓶，4℃保存。临用前加入 5mL 蒸馏水，充分溶解。 

粗酶液提取：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL试剂一）进行冰浴匀浆。13000g，4℃离心 10min，取上清置冰上待测。

Gal LDH 测定操作：1. 分光光度计预热 30 min，调节波长到 550nm，L-半乳糖酸-1,4-内酯脱氢酶(Gal LDH)测试盒