脱氢抗坏血酸还原酶（DHAR）测试盒

分光光度法 50 管/48 样 

注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。 

测定意义： 

DHAR 存在于细胞质、线粒体和叶绿体中。DHAR 催化 GSH 还原 DHA 生成 AsA 和 GSSG，调控细胞 AsA/DHA 比值，是抗坏血酸-谷胱-甘肽氧化还原循环的关键酶。提高植物体内的DHAR 活性，可提高植物食品中 AsA 含量，进而提高植物食品的营养品质。 

测定原理： 

DHAR 催化 GSH 还原 DHA 生成 AsA，通过测定 DHA 减少速率，计算 DHAR 活性。 

实验中所需仪器及设备： 

研钵、冰、低温离心机、紫外分光光度计、1mL 石英比色皿、可调式移液器和蒸馏水。 

试剂组成和配制： 

试剂一：液体 50 mL×1 瓶，4℃保存。 

试剂二：液体 35 mL×1 瓶，4℃保存。 

试剂三：粉剂×1 瓶（棕色），4℃保存。临用前加入 5mL 蒸馏水充分溶解。 

试剂四：粉剂×1 瓶，4℃保存。临用前加入 5mL 蒸馏水充分溶解。 

粗酶液提取： 

1. 按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入1mL 试剂一）进行冰浴匀浆。8000g，4℃离心 10min，取上清置冰上待测。

2. 细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议500 万细胞加入 1mL 试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min）；8000g 4℃离心 20min，取上清液置冰上混匀待测。

3. 血清等液体：直接测定。脱氢抗坏血酸还原酶（DHAR）测试盒