脯氨-酸（PRO）含量测试盒

分光光度法50管/48样

注   意 ：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义：

Pro广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，逆境条件下，植物体内Pro含量显著增加。Pro增加量在一定程度上反映了抗逆性，抗旱性强的品种往往积累较多的脯/氨酸。因此，脯/氨酸增加量可以作为抗逆育种的生理指标之一。

测定原理：

用磺基水杨酸（SA）提取Pro，加热处理后，Pro与酸性茚三酮溶液反应生成红色；加甲苯萃取后，在520nm测定吸光度。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、冰乙酸50mL、甲苯50mL、研钵、冰和蒸馏水。

脯氨-酸（PRO）含量测试盒

试剂的组成和配制：

提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存。

试剂一：冰乙酸25 mL×1瓶， 4℃保存。（自备）

试剂二：液体25 mL×1瓶， 4℃保存。

试剂三：甲苯50mL×1瓶，4℃保存。（自备）

样品测定的准备：

1、细菌、细胞或组织样品的制备：

细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；之后置95℃水浴振荡提取10min；10000g，25℃离心10min，取上清，冷却后待测。

组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行匀浆；之后置95℃水浴振荡提取10min；10000g，25℃离心10min，取上清，冷却后待测。