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甘油三酯(TG)含量测试盒

简要描述:甘油三酯(TG)含量测试盒测定意义:
TG是长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,不仅是细胞膜的主要成分,也是重要呼吸底物。
测定原理:用异丙醇提取TG,脂蛋白酯酶水解TG生成甘油和脂肪酸(FFA),甘油与三磷酸腺苷在甘油激酶和磷酸甘油氧化酶催化下生成H2O2,过氧化物酶催化过氧化氢氧化4-氨基偶联酚,生成有色化合物,在505nm处有特征吸收峰。

  • 产品型号:TG-1-M
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2024-05-14
  • 访  问  量:629
详情介绍

甘油三酯(triglyceride, TG)含量测定试剂盒说明书:

微量法100T/96S。

注意 :正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义:

TG是长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,不仅是细胞膜的主要成分,也是重要呼吸底物。

甘油三酯(TG)含量测试盒测定原理:

用异丙醇提取TG,脂蛋白酯酶水解TG生成甘油和脂肪酸(FFA),甘油与三磷酸腺苷在甘油激酶和磷酸甘油氧化酶催化下生成H2O2,过氧化物酶催化过氧化氢氧化4-氨基偶联酚,生成有色化合物,在505nm处有特征吸收峰。

自备仪器和用品:

酶标仪、台式离心机、可调式移液枪、96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂组成和配置:

试剂一:液体120 mL×1瓶,4℃保存。

试剂二:液体12 mL×1瓶,4℃保存。

试剂三:液体12 mL×1瓶,4℃避光保存。

TG的提取:

组织中TG的提取:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆,8000g,4℃离心10min,取上清,即TG待测液。

2、细胞、细菌中TG的提取:先收集400-500万细胞或细菌到离心管内,离心后弃上清,加1mL试剂一,超声波破碎1min(强度20%,超声2s,停1s),8000g,4℃离心10min,取上清,即TG待测液。

3、血清(浆)样品:直接测定。

甘油三酯(TG)含量测试盒测定操作:

酶标仪预热30min,调节波长到505nm。

试剂(μL)

空白管

测定管

样本


10

试剂一

10


试剂二

95

95

试剂三

95

95

混匀,室温下静置20min,于505nm波长处读取吸光值,记为A空白和A测定,△A=A测定-A空白。空白管只需测一管。

计算公式:

标准曲线:y=0.3261x-0.0199;R2=0.9979;x:标准品浓度(mg/mL) y:吸光值差值ΔA。

1. 血清(浆)中甘油三酯含量计算:

TG含量(mg/mL)=(ΔA+0.0199)÷ 0.3261=3.07×(ΔA+0.0199)

2. 组织、细菌或细胞中甘油三酯含量计算:

(1)按样本蛋白浓度计算

TG含量(mg/ mg prot)= (ΔA+0.0199)÷0.3261×V样÷(Cpr×V样)=3.07×(ΔA+0.0199)÷Cpr

(2)按样本质量计算

TG含量(mg/ g 鲜重)=(ΔA+0.0199)÷0.3261×V样÷(W×V样÷V样总)=3.07×(ΔA+0.0199)÷ W

V样:加入样本体积,0.01mL;V样总:加入试剂一体积,1mL;W:样本质量,g;

Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL。

注意事项:

1. 试剂盒中有易挥发性物质,实验过程中需佩戴手套和口罩,试剂瓶盖打开后应该及时盖紧。

2. 检出限为100μg/mL。








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