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线粒体分离和线-粒体酶提取测试盒

简要描述:线粒体分离和线-粒体酶提取测试盒
分光光度法 50 管/48 样

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义
线粒体是半自主性细胞器,不仅是细胞内氧化磷酸化和合成三磷酸腺苷(ATP)的主要场所, 为细胞的活动提供能量,而且在许多生命活动中具有重要调控作用。因此,准确和全面分离 保持正常活性的线粒体已经成为许多研究的前提。

  • 产品型号:XLTT-2
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2023-04-29
  • 访  问  量:448
详情介绍

线粒体分离和线-粒体酶提取测试盒

分光光度法 50 管/48 样 

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定 

测定意义 

线粒体是半自主性细胞器,不仅是细胞内氧化磷酸化和合成三磷酸腺苷(ATP)的主要场所,为细胞的活动提供能量,而且在许多生命活动中具有重要调控作用。因此,准确和全面分离保持正常活性的线粒体已经成为许多研究的前提。 

测定原理 

利用专门试剂温和匀浆组织和细胞,再采用差速离心法从匀浆中分离完整线粒体;利用专门试剂,配合超声波破碎线粒体,可以得到保持活性的线粒体酶。 

需自备的仪器和用品 

超声波破碎仪、台式离心机、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。 

试剂的组成和配制 

试剂一:50mL×1 瓶,-20℃保存; 

试剂二:10mL×1 瓶,-20℃保存; 

试剂三:10mL×1 瓶,-20℃保存; 

试剂四:1mL×1 支,-20℃保存; 

提取步骤 

1、 准确称取约 0.1g 组织或收集约 500 万细胞,加入 1mL 试剂一和 10uL 试剂四,用冰浴匀浆器或研钵研磨。 

2、 4 ℃ 600 g 离心 5min。 

3、 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,4 ℃ 11000 g 离心 10min。 

4、 上清液即胞浆提取物,可用于研究线粒体蛋白向胞浆的释放。 线粒体分离和线-粒体酶提取测试盒

5、 沉淀为完整线粒体。含有完整的内膜和外膜,并具有线粒体的生理功能。可用于线粒体的生理功能等方面的研究。 

6、 在沉淀中加入 200uL 试剂二和 2uL 试剂四,超声波破碎(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3 秒,间隔 10 秒,重复 30 次),可用于线粒体酶活性测定。 

7、 在沉淀中加入 200uL 试剂三和 2uL 试剂四,超声波破碎(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3 秒,间隔 10 秒,重复 30 次),可用于线粒体蛋白浓度测定。



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